Penelitian ini bertujuan untuk menggetahui kesulitan belajar online pada mahasiswa yang mengambil mata kuliah Bioteknologi menggunakan pembelajaran daring di program studi Tadris Biologi. Metode yang digunakan dalam penelitian ini adalah deskriptif kualitatif. Teknik pengumpulan data berupa wawancara yang berisikan pertanyaan dan di berikan kepada informan melalui google form secara online yang kemudian di analisis secara deskriptif. Berdasarkan hasil penelitian ditemukan bahwa terdapat faktor internal dan eksternal kesulitan belajar online mahasiswa pada mata kuliah Bioteknologi menggunakan pembelajaran oline di program studi Tadris Biologi IAIN Kerinci. Faktor internal kesulitan belajar online berupa minat, motivasi, Pengaturan Waktu Belajar. Dan untuk faktor eksternal kesulitan belajar online berupa Jaringan, kuota internet, media pembelajaran, dan lingkungan belajar.